培養(yǎng)細(xì)胞的過程中，換液是一項(xiàng)常規(guī)的操作，通過換液清除掉細(xì)胞在生長(zhǎng)過程中產(chǎn)生的代謝廢物，補(bǔ)充新鮮的含血清培養(yǎng)基，使細(xì)胞能夠正常生長(zhǎng)。
換液前工作準(zhǔn)備
環(huán)境準(zhǔn)備：相對(duì)密封、防塵、防菌的無菌室
操作者準(zhǔn)備：雙手清潔呈可操作狀態(tài)
物品準(zhǔn)備：超凈工作臺(tái)、CO2培養(yǎng)箱、裝有75%醫(yī)用消毒酒精的酒精噴壺、PBS緩沖液、含血清培養(yǎng)基、巴氏吸管、移液器、廢液缸。
工作準(zhǔn)備：預(yù)熱完全培養(yǎng)基，酒精棉擦拭培養(yǎng)基瓶外表面后移入生物安全柜或超凈工作臺(tái)。
細(xì)胞培養(yǎng)箱中取出的細(xì)胞，酒精棉擦拭培養(yǎng)瓶或皿外表面，移入生物安全柜或超凈工作臺(tái)。待生物安全柜中的循環(huán)風(fēng)將試劑瓶和培養(yǎng)瓶的外表面吹拂幾分鐘后，擰開培養(yǎng)基瓶蓋虛掩，擰開培養(yǎng)瓶瓶蓋虛掩，培養(yǎng)皿蓋不用擰。
方式一、細(xì)胞全換液
如果是貼壁細(xì)胞，可以用全量換液法，直接吸去全部舊培養(yǎng)基，補(bǔ)充足量新鮮完全培養(yǎng)基。
具體步驟：
1、將器材放入超凈臺(tái)，打開紫外照射滅菌，若是培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)溫度比較敏感，可以將含血清的培養(yǎng)基瓶放入37℃的水浴箱使得培養(yǎng)基溫度在37℃，再轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)紫外滅菌。另外，細(xì)胞培養(yǎng)間也需要紫外照射半小時(shí)左右。
2、從培養(yǎng)箱取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒，轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)，打開蓋子，輕輕吸出舊的培養(yǎng)液，可用移液器加入新鮮含血清培養(yǎng)基，注意一定不要從細(xì)胞貼壁面加入培養(yǎng)基，應(yīng)從側(cè)壁加，動(dòng)作輕柔，以免沖落細(xì)胞。
3、加好培養(yǎng)基后，蓋上蓋子，在瓶子上做標(biāo)記，注明換液時(shí)間，細(xì)胞種類，操作人員等信息。
4、放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴一噴瓶子表面，然后應(yīng)記得整理操作臺(tái)，用酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，清理廢液和垃圾。
方式二、細(xì)胞半換液
如果是懸浮細(xì)胞，可以用半量換液法。細(xì)胞半換液又稱細(xì)胞半量換液，即棄掉一半舊的培養(yǎng)基，再加一半新的進(jìn)去，但該方法會(huì)損失一定量的細(xì)胞。
半換液原因：
1、給細(xì)胞提供適應(yīng)的緩沖環(huán)境；
2、細(xì)胞生長(zhǎng)過程中可能會(huì)分泌某些生長(zhǎng)因子，促進(jìn)生長(zhǎng)；
3、節(jié)省材料
4、方便操作：比如96孔板，換液很麻煩。所以常采用排槍進(jìn)行半換液；
5、對(duì)于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)，有時(shí)也會(huì)選用半換液減低細(xì)胞密度；
操作步驟：
1、吸去一半舊培養(yǎng)基
2、補(bǔ)充新鮮完全培養(yǎng)基。
懸浮細(xì)胞如果不想損失細(xì)胞，那就需要將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到離心管中，離心去除舊培養(yǎng)基，再用新培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀。
